Studijní text

1. Připravte vzorek fluorescenčního barviva (odvážením a rozpuštěním ve vodě).
2. Vláknovým spektrometrem změřte emisní spektrum LED zdroje světla v transmisním uspořádání.
3. Změřte absorpční spektrum připraveného vzorku. Určete rozsah vlnových délek, které použijete pro excitaci fluorescence.
4. Mezi světelný zdroj a světlovod vložte ručně nastavitelný monochromátor a v transmisním uspořádání změřte intenzitu světla vystupujícího z monochromátoru ve spektrálním rozsahu odpovídajícím rozsahu vlnových délek použitých pro excitaci fluorescence (po 10 nm).
5. Uspořádání spektrometru změňte na detekci pod pravým úhlem a změřte intenzitu fluorescence vzorku pro celý rozsah excitačních vlnových délek (tak zvaná excitačně emisní matice). Naměřené hodnoty intenzity fluorescence korigujte o temný signál spektrofotometru, normalizujte na intenzitu excitace a vyneste do 3D grafu.
6. Z excitačně emisní matice vyberte data odpovídající synchronně skenovacímu fluorescenčnímu (SSF) spektru s Δλ = 60 nm.

Student si může úlohu zapsat až po úspěšném absolvování nejméně 3 úloh.

Základní vztahy a klíčová slova:

Fluorescence, fosforescence, Stokesův posun, fluorescenční barviva

Pokyny k měření