Rozdíly

Zde můžete vidět rozdíly mezi vybranou verzí a aktuální verzí dané stránky.

--- zadani:u_334 [20.01.2022 13:48]
Kudrnová Hana Mgr.
+++ zadani:u_334 [13.01.2025 14:56] (aktuální)
Kudrnová Hana Mgr.
@@ Řádek 3: / Řádek 3: @@
 ====== (34) Fluorescenční spektroskopie ======
+** Úlohu nelze měřit ve dvojici. **
@@ Řádek 9: / Řádek 11: @@
 ===== Pracovní úkol =====
+(Pracovní úkoly 3. a 7. jsou nepovinné! Student se sám rozhodne, chce-li je splnit nebo ne.)
+  - Změřte transmisní spektrum připraveného vzorku rhodaminu B ve skleněné kyvetě ve srovnání s čistým rozpouštědlem – etanolem. Excitační monochromátor nastavte na nultý řád (kolem 2 nm), aby procházelo celé spektrum excitační LED.
+  - Proměřte spektra LED po filtrování excitačním monochromátorem v rozsahu 442–580 nm s krokem 6 nm (transmisní uspořádání s kyvetou etanolu). Poté využijte stejné vlnové délky pro excitaci fluorescence rhodaminu B (světlovod musí být přendán z transmisního uspořádání na uspořádání v pravém úhlu).
+  - Detekční světlovod přendejte na příslušný port integrační koule. Zapněte excitační LED, proud nastavte na 10 mA a nechte ustálit nejméně 10 min. Změřte postupně spektra při umístění kyvet na držák v integrační kouli: etanol (reference), rhodamin B, prázdná plastová kyveta (reference), kyveta s proužky luminoforu z bílého LED světla. Každou dvojici porovnávaných vzorků můžete měřit vícekrát pro posouzení stability a reprodukovatelnosti výsledku.
+  - (data z úkolu 1) Využitím Lambertova - Beerova zákona převeďte transmisní spektrum na absorpční koeficient //κ// [cm<sup>-1</sup>] a z jeho hodnoty v maximu absorpčního píku odhadněte koncentraci //c// rhodaminu B s využitím hodnoty molárního absorpčního koeficientu //ε// = 1,1 × 10<sup>3</sup> L·mol<sup>-1</sup>·cm<sup>-1</sup> (při použití dekadického logaritmu).
+  - (data z úkolu 2) Zpracujte excitační spektrum (integrované emisní spektrum vydělené integrovaným excitačním píkem).
+  - (data z úkolů 1 a 2) Vyneste vhodně normované absorpční, excitační a emisní spektrum (pro excitaci např. 502 nm) do jednoho grafu. Určete Stokesův posun mezi píkem absorpce a emise.
+  - (data z úkolu 3) Spočítejte kvantovou a výkonovou účinnost rhodaminu B a luminoforu.
-  -  Připravte vzorek fluorescenčního barviva (odvážením a rozpuštěním ve vodě).
-  -  Vláknovým spektrometrem změřte emisní spektrum LED zdroje světla v transmisním uspořádání.
-  -  Změřte absorpční spektrum připraveného vzorku. Určete rozsah vlnových délek, které použijete pro excitaci fluorescence.
-  -  Mezi světelný zdroj a světlovod vložte ručně nastavitelný monochromátor a v transmisním uspořádání změřte intenzitu světla vystupujícího z monochromátoru ve spektrálním rozsahu odpovídajícím rozsahu vlnových délek použitých pro excitaci fluorescence (po 10 nm).
-  - Uspořádání spektrometru změňte na detekci pod pravým úhlem a změřte intenzitu fluorescence vzorku pro celý rozsah excitačních vlnových délek (tak zvaná excitačně emisní matice). Naměřené hodnoty intenzity fluorescence korigujte o temný signál spektrofotometru, normalizujte na intenzitu excitace a vyneste do 3D grafu.
-  - Z excitačně emisní matice vyberte data odpovídající synchronně skenovacímu fluorescenčnímu (SSF) spektru s //Δλ// = 60 nm.
@@ Řádek 24: / Řádek 30: @@
 ** Základní vztahy a klíčová slova: **
-Fluorescence, fosforescence, Stokesův posun, fluorescenční barviva
+Fluorescence, fotoluminiscence, Stokesův posun, fluorescenční barvivo, luminofor, účinnost
@@ Řádek 30: / Řádek 36: @@
+**{{:zadani:pokyny:uloha34fluocitlivost.xlsx|Kalibrační křivka citlivosti systému s integrační koulí}}**

Základní fyzikální praktikum

Uživatelské nástroje

Nástroje pro tento web

Rozdíly

Nástroje pro stránku