... vše o fyzikálním praktiku najdete právě na těchto stránkách
UK • MFF • KVOF
Zde můžete vidět rozdíly mezi vybranou verzí a aktuální verzí dané stránky.
Obě strany předchozí revize Předchozí verze Následující verze | Předchozí verze Následující verze Obě strany příští revize | ||
zadani:335 [12.01.2024 10:37] Kudrnová Hana Mgr. |
zadani:335 [12.01.2024 10:43] Kudrnová Hana Mgr. |
||
---|---|---|---|
Řádek 15: | Řádek 15: | ||
- Přímo v praktiku analyzujte pomocí programu ImageJ PSF ve třech rovinách z (z<0, z=0, z>0), vykreslete. | - Přímo v praktiku analyzujte pomocí programu ImageJ PSF ve třech rovinách z (z<0, z=0, z>0), vykreslete. | ||
- Určete rozlišení Rayleighovým kritériem. Srovnejte s teoretickou hodnotou pro známou emisní délku barviva Nile Red 660 nm a numerickou aperturu použitého objektivu. | - Určete rozlišení Rayleighovým kritériem. Srovnejte s teoretickou hodnotou pro známou emisní délku barviva Nile Red 660 nm a numerickou aperturu použitého objektivu. | ||
+ | - Použijte mikroskop k měření nanometrových vzdáleností metodou FRET. | ||
+ | - Připravte vzorky kuliček B1, B2 dle pokynů. | ||
+ | - Uložte obraz fluorescence obou vzorků s dostatečným počtem kuliček dle pokynů. | ||
+ | - Určete rozdělení barvy emise kuliček vzorků B1 a B2. Zpracujte formou histogramu pro relativní intenzitu v zeleném a červeném RGB kanálu emise. Zpracujte výsledky graficky. | ||
+ | - Diskutujte výsledná rozdělení. Odpovídá histogram očekávanému počtu vzdáleností barviv Cy3 a Cy5 v měřených vzorcích? Jste schopni rozlišit vzdálenost 4 a 20 bázových párů DNA? Je možné z měření určit účinnost přenosu excitace (za předpokladu E=1 pro 4 bázové páry a E=0 pro vzorek B1), nebo je třeba znát další parametry detekce? | ||
+ | - Srovnáním šíře histogramů s křivkou citlivosti na vzdálenost barviv (Obr. 5 studijního textu) odhadněte rozlišení a rozsah měřitelných vzdáleností touto metodou. | ||
+ | |||
- | |||
**O úlohu se student může zajímat až po absolvování nejméně poloviny běžných úloh.** | **O úlohu se student může zajímat až po absolvování nejméně poloviny běžných úloh.** | ||
Pro stanovení termínu měření a zápis na úlohu je třeba včasná **předchozí domluva s vedoucí praktika**. | Pro stanovení termínu měření a zápis na úlohu je třeba včasná **předchozí domluva s vedoucí praktika**. |