... vše o fyzikálním praktiku najdete právě na těchto stránkách
UK • MFF • KVOF
Zde můžete vidět rozdíly mezi vybranou verzí a aktuální verzí dané stránky.
Obě strany předchozí revize Předchozí verze Následující verze | Předchozí verze | ||
zadani:u_334 [10.03.2022 11:20] Kudrnová Hana Mgr. |
zadani:u_334 [13.01.2025 14:56] (aktuální) Kudrnová Hana Mgr. |
||
---|---|---|---|
Řádek 3: | Řádek 3: | ||
====== (34) Fluorescenční spektroskopie ====== | ====== (34) Fluorescenční spektroskopie ====== | ||
+ | |||
+ | ** Úlohu nelze měřit ve dvojici. ** | ||
Řádek 9: | Řádek 11: | ||
===== Pracovní úkol ===== | ===== Pracovní úkol ===== | ||
+ | (Pracovní úkoly 3. a 7. jsou nepovinné! Student se sám rozhodne, chce-li je splnit nebo ne.) | ||
- Změřte transmisní spektrum připraveného vzorku rhodaminu B ve skleněné kyvetě ve srovnání s čistým rozpouštědlem – etanolem. Excitační monochromátor nastavte na nultý řád (kolem 2 nm), aby procházelo celé spektrum excitační LED. | - Změřte transmisní spektrum připraveného vzorku rhodaminu B ve skleněné kyvetě ve srovnání s čistým rozpouštědlem – etanolem. Excitační monochromátor nastavte na nultý řád (kolem 2 nm), aby procházelo celé spektrum excitační LED. | ||
- | - Proměřte spektra LED po filtrování excitačním monochromátorem v rozsahu 442–590 nm s krokem 6 nm (transmisní uspořádání s kyvetou etanolu). Poté využijte stejné vlnové délky pro excitaci fluorescence rhodaminu B (světlovod musí být přendán z transmisního uspořádání na uspořádání v pravém úhlu). | + | - Proměřte spektra LED po filtrování excitačním monochromátorem v rozsahu 442–580 nm s krokem 6 nm (transmisní uspořádání s kyvetou etanolu). Poté využijte stejné vlnové délky pro excitaci fluorescence rhodaminu B (světlovod musí být přendán z transmisního uspořádání na uspořádání v pravém úhlu). |
- Detekční světlovod přendejte na příslušný port integrační koule. Zapněte excitační LED, proud nastavte na 10 mA a nechte ustálit nejméně 10 min. Změřte postupně spektra při umístění kyvet na držák v integrační kouli: etanol (reference), rhodamin B, prázdná plastová kyveta (reference), kyveta s proužky luminoforu z bílého LED světla. Každou dvojici porovnávaných vzorků můžete měřit vícekrát pro posouzení stability a reprodukovatelnosti výsledku. | - Detekční světlovod přendejte na příslušný port integrační koule. Zapněte excitační LED, proud nastavte na 10 mA a nechte ustálit nejméně 10 min. Změřte postupně spektra při umístění kyvet na držák v integrační kouli: etanol (reference), rhodamin B, prázdná plastová kyveta (reference), kyveta s proužky luminoforu z bílého LED světla. Každou dvojici porovnávaných vzorků můžete měřit vícekrát pro posouzení stability a reprodukovatelnosti výsledku. | ||
- | - (data z úkolu 1) Využitím Lambertova-Beerova zákona převeďte transmisní spektrum na absorpční koeficient //κ// [cm-1] a z jeho hodnoty v maximu absorpčního píku odhadněte koncentraci c rhodaminu B s využitím hodnoty molárního absorpčního koeficientu //ε// = 1,1 × 10-3 L·mol-1·cm-1 (při použití dekadického logaritmu). | + | - (data z úkolu 1) Využitím Lambertova - Beerova zákona převeďte transmisní spektrum na absorpční koeficient //κ// [cm<sup>-1</sup>] a z jeho hodnoty v maximu absorpčního píku odhadněte koncentraci //c// rhodaminu B s využitím hodnoty molárního absorpčního koeficientu //ε// = 1,1 × 10<sup>3</sup> L·mol<sup>-1</sup>·cm<sup>-1</sup> (při použití dekadického logaritmu). |
- (data z úkolu 2) Zpracujte excitační spektrum (integrované emisní spektrum vydělené integrovaným excitačním píkem). | - (data z úkolu 2) Zpracujte excitační spektrum (integrované emisní spektrum vydělené integrovaným excitačním píkem). | ||
- (data z úkolů 1 a 2) Vyneste vhodně normované absorpční, excitační a emisní spektrum (pro excitaci např. 502 nm) do jednoho grafu. Určete Stokesův posun mezi píkem absorpce a emise. | - (data z úkolů 1 a 2) Vyneste vhodně normované absorpční, excitační a emisní spektrum (pro excitaci např. 502 nm) do jednoho grafu. Určete Stokesův posun mezi píkem absorpce a emise. | ||
Řádek 31: | Řádek 34: | ||
**{{:zadani:pokyny:mereni_334.pdf|Pokyny k měření}}** | **{{:zadani:pokyny:mereni_334.pdf|Pokyny k měření}}** | ||
+ | |||
+ | |||
+ | **{{:zadani:pokyny:uloha34fluocitlivost.xlsx|Kalibrační křivka citlivosti systému s integrační koulí}}** | ||