====== (34) Fluorescenční spektroskopie ======


{{:zadani:texty:txt_334.pdf|Studijní text}}


===== Pracovní úkol =====

  - Změřte transmisní spektrum připraveného vzorku rhodaminu B ve skleněné kyvetě ve srovnání s čistým rozpouštědlem – etanolem. Excitační monochromátor nastavte na nultý řád (kolem 2 nm), aby procházelo celé spektrum excitační LED.
  - Proměřte spektra LED po filtrování excitačním monochromátorem v rozsahu 442–580 nm s krokem 6 nm (transmisní uspořádání s kyvetou etanolu). Poté využijte stejné vlnové délky pro excitaci fluorescence rhodaminu B (světlovod musí být přendán z transmisního uspořádání na uspořádání v pravém úhlu). 
  - Detekční světlovod přendejte na příslušný port integrační koule. Zapněte excitační LED, proud nastavte na 10 mA a nechte ustálit nejméně 10 min. Změřte postupně spektra při umístění kyvet na držák v integrační kouli: etanol (reference), rhodamin B, prázdná plastová kyveta (reference), kyveta s proužky luminoforu z bílého LED světla. Každou dvojici porovnávaných vzorků můžete měřit vícekrát pro posouzení stability a reprodukovatelnosti výsledku.
  - (data z úkolu 1) Využitím Lambertova - Beerova zákona převeďte transmisní spektrum na absorpční koeficient //κ// [cm<sup>-1</sup>] a z jeho hodnoty v maximu absorpčního píku odhadněte koncentraci //c// rhodaminu B s využitím hodnoty molárního absorpčního koeficientu //ε// = 1,1 × 10<sup>3</sup> L·mol<sup>-1</sup>·cm<sup>-1</sup> (při použití dekadického logaritmu).
  - (data z úkolu 2) Zpracujte excitační spektrum (integrované emisní spektrum vydělené integrovaným excitačním píkem).
  - (data z úkolů 1 a 2) Vyneste vhodně normované absorpční, excitační a emisní spektrum (pro excitaci např. 502 nm) do jednoho grafu. Určete Stokesův posun mezi píkem absorpce a emise.
  - (data z úkolu 3) Spočítejte kvantovou a výkonovou účinnost rhodaminu B a luminoforu.

   



**Student si může úlohu zapsat až po úspěšném absolvování nejméně 3 úloh.**


** Základní vztahy a klíčová slova: **

Fluorescence, fotoluminiscence, Stokesův posun, fluorescenční barvivo, luminofor, účinnost


**{{:zadani:pokyny:mereni_334.pdf|Pokyny k měření}}** 

**{{:zadani:pokyny:uloha34fluocitlivost.xlsx|Kalibrační křivka citlivosti systému s integrační koulí}}**